【实验原理】

代谢组学实验的原理是通过定性鉴别和定量描述生物基质中小分子代谢物的表达与修饰变化，以系统反馈生命体对自身机体调控或外界环境扰动所做出的代谢应答。代谢组学研究的样本主要包括生物体液和复杂的生物组织或细胞样本。常用的分析鉴定技术有色谱质谱联用和核磁共振。

【实验步骤】

1. 实验设计

2. 样品制备

3. 数据采集

4. 数据预处理

5. 多实验数据集成/数据分析

【常见问题与注意事项】

取样基本原则

代表性和一致性

实验组与对照组样本在取材部位、时间处理等方面尽可能保持一致，从而保证实验的可信度；

迅速性

操作过程迅速，最大限度缩短样本采集到实验的时间；

低温原则

所有样本离体后，分离步骤应在4℃或冰上进行，分离好的样本立即存于-80℃，以免样本产生进一步代谢活动；

血液样本收集指南

血清：

1）用促凝管（没有促凝管则用离心管）收集血液，将促凝管/离心管直立、静置于试管架上，避免振荡、摔落；

2）避免阳光直射，室温；

3）检查凝血完全后，2500 ~ 3000 rpm，4℃ 低速离心5 min，吸取200 µL上清液至1.5 mL离心管中，若上清液较多可每管200 µL、多管分装，于-80 ℃冻存待用；

4）严禁反复冻融，如发生溶血则该样本不合格、需重新准备样本。合格样本用干冰运输。

血浆：

1）用抗凝管采血，采血后立刻轻柔上下颠倒8次，使抗凝剂与血液均匀混合（动作轻柔，以避免产生溶血）；

2）2500 ~ 3000 rpm，4 ℃低速离心5 min，吸取200 µL上清液分装至1.5mL离心管中，-80 ℃冻存待用；

3）血液样本采集后应立即把血浆从全血中分离出来，最晚不迟于采血后1 h内分离出血浆。合格样本用干冰运输。

（1）试管的使用

涉及到RNA等的多组学实验取样，请勿使用肝素钠抗凝管（对 RNA 相关实验有严重影响，抑制反转录酶活性而导致cDNA量不足）；

核磁实验（NMR）请勿使用EDTA抗凝管（影响图谱采谱）；

代谢实验取样不建议使用柠檬酸钠抗凝管（柠檬酸是TCA循环中的重要物质，使用柠檬酸钠抗凝剂会引入外源污染），请根据实验具体情况选用合适的抗凝管。

（2）影响因素

取血时如用酒精消毒，请擦干擦拭部位，待酒精完全挥发后再取样；

取血时如有使用麻醉剂，建议用异氟醚消毒，以避免在谱图中出现干扰峰。

（3）产率

血清参考产率：30% ~ 50%（例如：1 mL 全血大约能得 0.3 ~ 0.5 mL 血清）。

血浆参考产率：≈ 50 %（例如：1 mL全血大约能得 0.5 mL 血浆）。

采全血时如使用真空采血管，建议使用促凝管。

（4）冻存管的使用

强烈推荐收集尽量多的样本并分装冻存（同批次样本可以用于多项实验，且避免反复冻融而导致结果不理想），分装保存时推荐使用1.5 mL离心管，因为螺口冻存管帽内有一个密封用的橡胶垫圈，长期在-80 ℃/干冰等低温下，橡胶圈会变硬脆、易脱落，导致管口密封不严，样本渗露。

【交付标准】

1. 实验报告 

2. 真实实验结果

3. 原始图片

4. 实验原始数据

5. 剩余物料在周期内可返还（超过周期，不予返还）

康旭禾生物提供包括动物实验、细胞实验、分子实验、病理实验、流式检测实验及论文翻译、润色、投稿辅助等相关的各项服务。

联系方式：19379182007，19379182005，19379183390       

公司地址：江西省南昌市南昌县小蓝VR产业基地D座2楼