生物实验小白必备:细胞划痕实验步骤详解
除了transwell外,我们还可以用细胞划痕实验(cell ctratch test或wound healing assay)验证细胞迁移能力。
1.培养板划线标记:通常隔0.5-1cm划线,至少3条线;
2.细胞铺板:每孔接种5x105个细胞,数量可根据状态调整,但一定要铺匀(十字法或8字法)
3.细胞划线:200ul枪头垂直横线划线,尽量保证力度一致;
4.去除划下细胞:PBS洗涤2-3次,然后换无血清或低血清培养基培养细胞,根据实验目的进行药物处理或其他;
5.观察与计数:放入37摄氏度5%CO2培养箱孵育,适当时间取出进行拍照。注意:若药物处理后细胞形态变化,我们0h观察点可先将6孔板放入培养箱几分钟后再拿出来观察