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文 献 解 读

柚皮苷—抗自身免疫性肝炎的天然候选物：

抑制效能与肝脏保护机制

论文信息

标题: Naringin as a natural candidate for anti-autoimmune hepatitis: Inhibitory potencyandhepatoprotectivemechanism

杂志：Phytomedicine

影响因子：7.9

发表时间：2024年5月

作者: Qiaozhen Zhu, Yizhuo Jiang, Wenyuan Lin, Mengju Gao, Xiaoyang Chen, Xinyu Li, Haofei Wang, Xinli Niu, Junpeng Wang

关键词: 自身免疫性肝炎，柚皮苷，抑制效力，肝保护机制

摘要：

自身免疫性肝炎（AIH）是一种以T细胞介导的肝脏炎症为特征的疾病。尽管对其发病机制的理解有所进展，但有效的治疗选择仍然有限。柚皮苷（Naringin），一种柑橘类水果中丰富的黄酮类化合物，具有抗炎特性和对抗各种炎症性疾病的效果，包括药物诱导的肝损伤。然而，柚皮苷对AIH的确切效果及其涉及的机制尚不完全清楚。本研究旨在确定柚皮苷在AIH中的作用，探索其在此疾病中的靶点和作用。研究强调了柚皮苷作为预防或治疗T细胞介导的自身免疫性疾病包括AIH的潜力。

理论背景

AIH是一种慢性炎症性肝病，由免疫系统功能失调定义。它影响全球各年龄组的个体，女性更为常见。尽管AIH的发生率较高，但其确切的发病机制仍然未知。值得注意的是，肝脏的炎症环境涉及一系列复杂的分子过程，遗传和环境因素在AIH的发展中起着重要作用。AIH的标志性组织学特征是界面性肝炎，表现为在门静脉处淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞和浆细胞的密集浸润，表明自身免疫攻击。证据表明，CD4+ T细胞主要负责AIH，Th1细胞、Th17细胞、细胞毒性细胞和调节性T细胞之间的平衡可以影响其严重程度和持续时间。虽然皮质类固醇可能与硫唑嘌呤联合使用是AIH的主要治疗方法，但一些患者对此反应不佳，导致耐药或复发。因此，探索新的治疗方法对于那些无法从标准治疗中受益的患者至关重要。

研究缺口

传统中医是补充和替代医学的关键组成部分。在传统中医中发现的各种天然产品，如酚类、苷类、黄酮类、多糖类和生物碱，已显示出在调节免疫反应和炎症方面治疗AIH的有希望的结果。柚皮苷是柑橘类水果中发现的一种二氢黄酮化合物，由于A环和B环之间缺乏共轭，其在紫外光谱中表现出强烈的吸收峰（282 nm），表明其在各种生物活性和药理效应中的重要作用。证据表明，它具有抗炎和免疫调节特性，以及在减轻心肌和肝脏损伤、预防和治疗糖尿病并发症以及降低血脂水平方面的益处。重要的是，柚皮苷治疗已被证明可以通过调节炎症性细胞因子减轻自身免疫性关节炎（RA）和炎症性肠病（IBD），表明它是AIH的潜在治疗候选物。

研究目的与贡献

近年来，自动化系统显著进步，引发了各行各业和研究领域的革命。特别是，涉及网络药理学、分子对接、分子动力学（MD）模拟和实验验证的综合策略帮助揭示了天然化学物质对各种疾病治疗效果的分子途径。在本研究中，作者采用多方面的方法预测柚皮苷对T细胞介导的自身免疫性疾病和AIH的潜在多重靶点，将为柚皮苷对这些疾病的替代作用提供宝贵的见解。

研究方法概述

本研究使用网络药理学、分子对接和分子动力学模拟来预测连接柚皮苷、T细胞介导的自身免疫性疾病和AIH的HUB靶点。细胞热位移测定用于确定柚皮苷与HUB靶点的结合能力。体内实验确认了柚皮苷对ConA诱导的AIH的治疗效果和潜在机制。

柚皮苷、T细胞介导的自身免疫性疾病和AIH之间共有455个共享靶点。通过PPI网络识别了十个HUB基因（AKT1、ALB、IL-6、IL-1β、CTNNB1、TNF、TP53、MAPK3、VEGFA和JUN）。基因本体分析揭示了参与基因表达调节、脂多糖介导的信号传导和I-kappa激酶/ NFκB信号传导的作用。通路分析表明TNF、Th1/Th2细胞分化和Toll样受体通路具有有利的柚皮苷-HUB基因结合。

分子对接证实白蛋白（ALB）、IL-1β、IL-6和TNF是柚皮苷的主要靶点。分子动力学模拟显示ALB-柚皮苷、TNF-α-柚皮苷和IL-1β-柚皮苷复合物结合稳定。柚皮苷对AIH的肝脏保护作用得到了血清ALB增加和肝脏炎症性细胞因子包括IL-1β、IL-6和TNF-α减少的支持。

CETSA被用来确认柚皮苷与ALB和IL-1β的结合。结果表明，在血清中孵育2小时后，柚皮苷增强了ALB和IL-1β的热稳定性，表明柚皮苷与这些蛋白直接结合。

分子动力学模拟分析用于确认ALB-柚皮苷、TNF-柚皮苷和IL-1β-柚皮苷复合物的受体-配体结合稳定性。使用均方根偏差（RMSD）分析了复合物的移动性。初始ALB蛋白结构的RMSD范围为0.001至0.495 nm（平均0.341nm），而ALB-Naringin复合物的RMSD范围为0.001至0.622 nm（平均0.516nm。尽管复合物的RMSD较高，但两种结构显示出一致的RMSD模式，表明相对稳定的相互作用。这表明柚皮苷的存在并没有破坏复合物的稳定性，但可能诱导了ALB的局部构象变化。TNF-α-柚皮苷复合物在27-47 ns之间显示出轻微的RMSD增加，但之后达到了稳。IL-1β-柚皮苷复合物RMSF低于初始IL-1β结构（0.135 nm），表明存在平衡振荡。

为了进一步证实已确定的柚皮素可能保护AIH的枢纽靶点，作者测定了柚皮素在血清白蛋白、血清和肝脏炎症中的作用。ConA处理的小鼠血清ALB水平低于生理盐水处理的小鼠。然而，柚皮苷可抑制conA处理小鼠血清ALB的下降。此外，注射ConA可上调血清和肝脏中的促炎细胞因子，包括IL1β、IL-6和TNF-α。然而，柚皮苷治疗逆转了这些变化，表明柚皮苷可能靶向这些介质来缓解conA诱导的AIH。

结论

综上所述，本研究证实了给予柚皮苷可以通过提高血清白蛋白水平和减少系统和局部的促炎介质来减轻自身免疫性肝炎。通过网络药理学、分子对接、MD模拟和与炎症通路相关的CETSA分析来探索可能的机制。研究发现，柚皮苷是一种极具潜力的治疗自身免疫性肝炎的天然候选药物。