许多刚开始接触动物实验的小伙伴可能都会有点迷茫，不知道怎么给实验动物分组，要分几组、每组要几只动物，怎么分配。别担心，今天的文章就来给你一一解答。

我们要分几组？

做动物实验时，我们会设置不同的实验小组。怎么分组、每组多少动物，这些都直接影响到实验结果的可信度和统计分析。所以，设置实验动物分组是非常重要的一步。

一般来说，我们可以分为自身对照组、平行对照组。平行对照组又可以细分为正对照组和负对照组（也就是空白对照组）。

自身对照组：就是比较动物实验前后的数据。

正对照组：和自身对照组做相同的操作，但不包括我们要研究的那个因子（比如治疗的药物、给药的方法或部位）。

负对照组（空白对照）：什么操作都不做。

另外，还有一种常用的3组对照分组法：

设置空白对照（负对照）组、模型对照（正对照）组、阳性对照组。

模型对照组：对疾病模型动物做阴性处理（比如用溶剂或赋形剂）。

阳性对照组：对疾病模型动物用有效的药物治疗（或其他已知的有效处理）。

设计3个或以上的计量梯度。最终得到的分组如下：

分组的时候，可以根据实验的实际情况灵活调整。比如，如果实验中不需要疾病模型，那就可以去掉模型对照组；如果实验里没有阳性药，那就可以不设置阳性对照组。

每组要几只动物？

样本量并不是越大越好。样本量大不仅实验操作难度会增大，还会浪费实验经费，无法严格把控实验质量，也违反了实验动物的“3R原则”（替代、减少、优化）。但是，样本量过少也可能导致最终数据没有差异，出现阴性结论，这样的实验结果就不具备统计学意义和说服性。

确定每组动物数量的方法有几种：

第一种：最简单、适用范围最广的方法

在满足实验动物3R原则和统计学的前提下，每组至少6个样本量。其中，实验小鼠每组至少10只，大鼠每组6只，体型更大的动物每组样本量可以适当减少1~2只。

第二种：自由度（E）估算

自由度是方差分析中的重要指标。当E＜10时，表示样本量过小；当10≤E≤20时，表示样本量是正常值；当E＞20时，表示样本量过大。

第三种：严格计算样本量

如果对实验中的样本量要求非常严格，可以使用更复杂的公式来计算。

当基于两组均数计算样本量时，计算公式如下：

多组均数计算样本量时，计算公式如下：

上面三种方法中，后两种方法更偏向于临床研究使用，因为需要考虑人群中的个体差异。但我们使用的实验动物品系纯化度高、个体差异小，所以大多数的动物实验不必考虑个体差异因素的影响，可以直接参考第一个方法。同时，也可以多查阅文献和咨询有经验的小伙伴。

特别注意：如果实验中有损耗（比如动物死亡等原因），最好在正常的样本量基础上加上可供损耗数量的样本量。

怎么分配实验动物？

为了减少个体间的差异，保证最终实验数据的真实性，建议采用随机分配的方法。分配方法要根据不同的实验目的与对象来确定。常见的方法有：

1. 完全随机设计：将动物逐一编号，然后使用随机数表将动物分组。这个方法适用于个体之间差异较小的动物。

2. 随机区组设计：将所有的实验动物分为几个区组（建议区组数量＞3），区组中的样本数量控制在区组数的2倍及以上。之后将每区组的动物依照完全随机设计分配至各个实验分组中。这个方法适用于个体间差异较大的动物。

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