裸鼠，也被称为无胸腺裸鼠，是一种先天性胸腺缺陷的突变小鼠，其形成源于第VIII连锁群内裸体位点基因的纯合。

裸鼠在科学研究中展现出巨大的潜力，这主要归功于其nu基因独特的遗传特性。经过全球实验动物遗传育种学家的不懈努力，nu基因已被成功导入不同近交系动物中，从而创建了一系列动物模型。仅小鼠模型一种，就已建立了二十余种近交系裸鼠。

这些裸鼠具有不同的遗传背景和nu基因的遗传特性，为医学生物学研究者提供了一种极其宝贵的试验材料。本文将重点探讨裸鼠的成瘤实验方法。

常见的成瘤细胞

常见的易成瘤细胞：Hep-G2（肝癌）、Hep2（喉癌）、NCI-H460（大细胞肺癌）、A431（表皮癌）、SK-OV-3（卵巢癌）、MCF-7（乳腺癌）、SKBR3、A375/B16-F10（人黑色素瘤细胞）、SGC7901（人胃肿瘤细胞）以及KB（人口腔表皮样癌细胞）。

成瘤速度较慢的细胞：CNE（鼻咽癌）、A549（肺癌）、SPC-A-1（肺腺癌）、HT-29（结肠癌）、BEL-7402（肝癌）、MDA-MB-231（乳腺癌）、CT26（小鼠结肠癌细胞）、SH-SY5Y（人神经母细胞瘤细胞）、U251（人胶质瘤细胞）、BGC-823（人胃癌细胞）以及PC-3（人前列腺癌细胞）。

一些具有争议的细胞：Hela（宫颈癌）、HCT（人回盲肠癌细胞/人结直肠癌腺癌细胞）。其他常用的细胞还包括BMSC（骨髓间充质干细胞）。

裸鼠成瘤小技巧

1、裸鼠的选择：实验室常用的是BALB/c-nu裸小鼠。由于裸小鼠体内正常T细胞可能随年龄增长或受病毒感染等因素而增加，因此接种肿瘤实验一般采用4-6周龄的裸鼠。

2、细胞状态：细胞的状态是成瘤实验的关键。应取处于对数生长期的细胞，细胞密度达到80-90%为宜。在收集细胞前一天晚上更换新鲜培养基。

3、细胞处理：胰酶消化细胞后用预冷的PBS洗两遍，以去除细胞中残余的血清。然后用PBS或者无血清培养基吹打细胞沉淀至合适的浓度。一般皮下瘤接种的细胞量为1-5×10^6个细胞/支，接种体积为0.1-0.2ml。有条件的实验室也可以加基质胶以加速瘤块的生成。

4、接种技巧：细胞消化后应尽快接种到裸鼠皮下，一般尽量在半小时内完成。接种前用枪将细胞悬液充分的吹散，防止细胞成团。接种时，针头在皮下进针深一点，约1cm深，针头在皮下左右滑动几次，以便细胞接种成团。

5、保定裸鼠技巧：左手拇指和食指捏紧裸鼠颈背部皮肤，小拇指夹住裸鼠尾巴。

6、肿瘤观察与测量：接种后1-2周左右可以见到皮下开始出现肿块。根据肿瘤细胞的特性和接种细胞的量，一般皮下成瘤的周期为1-2个月。肿瘤大小测量一般为1周两次，使用游标卡尺测量肿瘤最长和最短部位，并计算体积。

裸鼠成瘤实验疑难解答

问：为什么选择裸鼠而不是普通老鼠或小白鼠？

答：裸鼠最大的特点是没有胸腺等免疫器官，免疫力几乎为零，对肿瘤细胞没有免疫作用，因此易于成瘤。

问：瘤块长起来又消失是怎么回事？

答：这可能是炎症反应导致肿瘤细胞被小鼠自身吸收。建议继续观察肿瘤细胞吸收之后是否能在几周内重新长出。如果长不起来，建议更换裸鼠。

问：是否可以在一只小鼠上进行多个点接种？

答：不可以。因为多个肿瘤块可能会相互影响。

问：肿瘤长不出来是怎么回事？

答：可能的原因包括肿瘤生长周期慢、细胞状态差或不易成瘤、小鼠周龄太大或存在免疫排斥等。建议根据具体情况调整实验条件或更换细胞系、小鼠品种。

问：肿瘤体积相差很大、大小不一是怎么回事？

答：这可能跟小鼠周龄及接种细胞量不一致导致。建议重新接种以确保实验结果的一致性。

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