转录调控项目信息总结

一、常见实验问题1. 野外取样野外取样无液氮、干冰等速冻如何保存？去除叶片表面的脂化膜，剪碎叶片，存于RNA later保存液中，提取时5倍体积提取。1-2天问题不大。2. 血液及肿瘤样本需要做哪些特殊处理血液和肿瘤样本由于RNA酶含量丰富，极易造成RNA的降解，因此在活体取样后，需要尽快放入液氮速冻或加入RNAlater防止RNA降解。2. 做转录组项目时RNA中很多DNA污染，可以建库吗？可以，磁珠调取的方法，不会有影响。但是蛋白污染的话会有影响，有些蛋白的存在会在后续建库造成干扰。3. …

细菌鉴定中常用的生理生化试验

一、实验目的(1)了解细菌生理生化反应原理，掌握常用的细菌鉴定生理生化反应试验方法。(2)了解细菌碳、氮代谢类型的多样性及细菌在不同培养基中的代谢产物在鉴别细菌中的意义。(3)了解细菌糖发酵实验、IMViC实验的原理及在肠道菌鉴定中的重要作用。二、实验原理微生物个体微小、结构简单，但种类繁多，在食品、医药、工农业、环保等人类生产生活的领域均有广泛涉及，涵盖了有益与有害的众多种类。分类是认识、研究客观事物的一种基本方法，我们要认识、研究和利用种群庞大的微生物资源…

超详细！HE染色介绍

苏木精-伊红染色法，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。1、嗜酸型&嗜碱性易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性和嗜酸性;而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性。1)嗜碱性嗜碱性是指组织和细胞内酸性物质成分对碱性染料(含有阳离子着色基团的染料，如苏木精、结晶紫、美蓝等)具有亲和性。2、苏木精&伊红1)苏木精由苏…

关于WB，你不得不注意的小细节

在蛋白印迹(Western blot，WB)实验中，确实需要注意一些操作要点以保证实验的准确性和可重复性。以下是一些主要的注意点： 一、样品制备 1.样品量要恰当：过多或过少的样品均可能影响到实验结果的准确性。 2.蛋白酶抑制剂的使用：在制备样品过程中应加入蛋白酶抑制剂，防止蛋白被降解。 3.提取、浓缩并保存样品：不立即用于实验的样品应适当提取、浓缩并保存在恰当的条件下以保持蛋白稳定不受损。 二、凝胶电泳 1.制备适当浓度的分子筛选凝胶：不同的蛋白分子量需要使用不同浓度的凝胶…

什么是PCR，病毒是如何被检测出来的？

聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断；可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。PCR实验室其实功能极其强大，定性分析和定量检测是它最大的两个应用方向，那除了新冠核酸检测，我们“万能”的PCR实验室还能做些什么呢？接下来就给…

细胞划痕实验步骤及注意事项

细胞划痕（Wound Healing)是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。其实验原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上，用微量头或其他硬物在细胞生长的中央区域划线，去除中央的细胞，然后继续培养细胞至设定时间（采用无血清或低血清（<2%）排除细胞增殖的影响），取出培养板，观察周边细胞是否生长（修复）至中央…

【科普小知识】动物实验的应用范围一般都有哪些？

动物实验在科学研究和医学发展中起到了至关重要的作用。通过动物实验，科学家们可以对人类生理和病理机制进行深入探索，对药物和治疗方法进行评估和筛选，以及对产品进行安全性和有效性测试。动物实验一、疾病机制研究动物模型是研究人类疾病机制的重要工具。通过建立与人类相似的疾病模型，科学家们可以在动物身上模拟疾病的发病过程，深入了解疾病的病因、病理生理机制以及疾病的发展和转归。这有助于发现新的治疗靶点，为新药研发提供理论支持。二、药物研发与筛选药物研发过程中，…

实验解析｜流式细胞术实验常见问题分析

流式细胞技术（Flow Cytometry，简称FCM）是一种高效的方法，用于分析和收集细胞悬液中的单个细胞。FCM的优势在于其速度快、结果客观，并且具有重要的统计意义。它能够处理复杂的样本，同时收集多个参数，其可靠性和重复性都非常出色。今天我将总结并分享一系列关于流式细胞技术的常见问题及其分析。对于流式细胞术的原理和步骤不甚清晰的同学，建议先阅读本公众号以往的文章，了解背景知识。1.荧光抗体染色无信号或信号弱（1）加入的抗体量不足：这是最简单的一种情况，只需要摸索实验…

【实验技术】一文了解分子生物学经典实验 western blot

一、基本原理Western Blot 即蛋白免疫印迹，是等量上样的蛋白样品通过电泳按分子量分离蛋白质、再转移到合适的膜上，然后通过特异性抗体对膜上的目的蛋白或特定位点修饰进行结合和识别，经过抗体偶联的显色或显影系统获得条带结果，通过分析条带位置和深度来分析目的蛋白或特定位点修饰的水平。二、步骤（一）由蛋白样品制备；制胶、上样、电泳；转膜；封闭、抗体孵育；曝光五个步骤组成，其简要流程如下：详细实验步骤：1.蛋白样品制备1.1蛋白样品制备选择合适的裂解液根据蛋白性质不…