细胞迁移实验影响因素汇总

细胞迁移实验是研究细胞在不同条件下的迁移能力的一种常用实验方法。以下是小编整理的关于细胞迁移实验的注意事项：细胞迁移实验注意事项1．细胞处理在进行细胞迁移实验前，应对需要检测迁移能力的细胞进行处理，如培养、传代、酶消化等。同时还需注意控制每次处理时间和方法的一致性，以保证实验结果的可靠性。2. 细胞计数在进行实验时，应精确计算每个实验组的细胞数。这可以通过显微镜下的视觉观察或使用细胞计数仪来完成。正确的细胞计数可以帮助进行实验设计和数据分析。3. 实验…

实验干货 | qPCR实验中经常忽略的实验细节！

在实验室的日常实验中，每一个细节都可能对结果产生重要影响，尤其是在进行实时荧光定量PCR(qPCR)实验时更是如此。繁忙的实验过程中，我们往往容易忽略一些看似微不足道但却至关重要的步骤。因此，不妨让我们一起回顾并重视那些常常被忽略的实验细节，确保实验结果的准确性和可靠性。01如何评判RNA质量？评判RNA质量是分子生物学实验中的一个关键步骤，尤其在涉及RNA测序、cDNA合成、qPCR等实验时，RNA的质量直接影响到实验结果的可靠性和准确性。以下是评判RNA质量的主要方法和步骤：…

​裸鼠成瘤实验经验分享

裸鼠成瘤实验经验分享

是谁还分不清PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR！

是谁还分不清PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR！PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR这四种技术都是基于聚合酶链式反应（PCR）的技术，但是它们之间存在一些区别。先来讲讲些四胞胎的概念：PCR：聚合酶链式反应（PCR）是一种体外扩增DNA分子的技术，利用DNA聚合酶和多个引物在所需温度下扩增目标DNA分子。PCR反应分为三个阶段：预变性、变性-退火-延伸和延伸。PCR技术主要用于DNA序列的扩增和检测，应用广泛，如基因克隆、DNA序列测定等。qPCR：实时定量聚合酶链式反应（qPCR）是一种实时检测PCR过程…

生物实验小白必备：细胞划痕实验步骤详解

生物实验小白必备：细胞划痕实验步骤详解除了transwell外，我们还可以用细胞划痕实验（cell ctratch test或wound healing assay）验证细胞迁移能力。1.培养板划线标记：通常隔0.5-1cm划线，至少3条线；2.细胞铺板：每孔接种5x105个细胞，数量可根据状态调整，但一定要铺匀（十字法或8字法）3.细胞划线：200ul枪头垂直横线划线，尽量保证力度一致；4.去除划下细胞：PBS洗涤2-3次，然后换无血清或低血清培养基培养细胞，根据实验目的进行药物处理或其他；5.观察与计数：放入37摄氏度5%CO…

康旭禾生物实验服务汇总

康旭禾生物实验服务汇总｜有找我做实验的吗，在线等

1 2 3 为什么做动物实验需要分组

为什么做动物实验需要分组1、统计学要求：在动物实验中，样本量的大小对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。统计学上要求一般至少每组有6个可用数据才有意义，这样可以确保实验结果的稳定性和可信度。然而，在某些特定的检测（如检测组织中基因或蛋白表达时），每组动物数量在3到6只或以上即可满足统计学分析要求。2、避免个体差异：每只动物在遗传、环境、生理等方面都可能存在差异，这些差异可能会影响到实验结果。通过分组并每组使用多只动物，可以减少由于个体差异导致的实验误差…

如何做好β-半乳糖苷酶染色！

结果β-半乳糖苷酶染色（β-Galactosidase Staining）是一种常用的细胞或组织活性检测方法。这种染色方法基于衰老时SA-β-Gal（senescence-associated β-galactosidase）活性水平上调，可以对衰老细胞或组织进行染色检测。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。不同类型样本实验操作1. 细胞样本染色1 贴壁细胞① 对于 6 孔板中培养的细胞，吸除细胞培养液，用 PBS 或 HBSS 洗涤 1 次，加入 1 ml 染色固定液，室温固定 15 分钟。② 吸除固定液，用 PBS 或 HBSS 洗涤…

最新！2024年国家自然科学基金评审结果公布！

以下内容来源：国家自然科学基金委员会网站2024年国家自然科学基金不予资助项目复审工作注意事项 按照《国家自然科学基金项目复审管理办法》（以下简称《办法》，详见自然科学基金委官方网站首页“政策法规”栏目）规定，申请人如对不予资助决定有异议，可向自然科学基金委提出不予资助项目复审申请。相关注意事项如下。一、提出复审申请1．不予资助项目复审申请接收工作自8月23日开始，9月6日16时截止。2．不予资助项目复审申请人登录科学基金网络信息系统（以下简称信息系统，https…

课题如何申报？最实用操作指南来了

对于科研人员来说，项目申报的主要流程早已轻车驾熟，十分熟悉。不过对于刚刚从事科研事业的新人来说，项目申报流程如何操作？如何选择合适的申报项目，可能并不十分清楚。今天，我们就来聊一聊科研项目与课题申报的究竟是怎么一回事儿。01项目VS课题课题，是人们从事研究前人或同时代的人还未认识或解决的问题，它具有较为单一而又独立的特征。项目，是指事物分成的门类或者说是由若干个彼此有联系的课题所组成的一个较为复杂的、带有综合性的科研问题。课题与项目既有区别又有联系，…

动物模型 | 抑郁症动物模型：探索心理疾病的奥秘

抑郁症，这个现代生活中常见的心理疾病，以其持续的心情低落和对日常生活的严重影响，成为现代人心理疾病中最为常见的类型。它不仅影响患者的情绪，还会导致思维迟缓、意志活动减退、认知功能损害以及各种躯体症状，如睡眠障碍、乏力、食欲减退和体重下降等。抑郁症的病理特征包括HPA轴激素分泌异常、单胺氧化酶含量升高、5-羟色胺含量下降和多巴胺分泌减少等。这种疾病不仅给患者本人带来痛苦，也给家庭和社会带来了沉重的负担。据世界卫生组织、世界银行和哈佛大学的联合研究显示，抑…

文献分享 | 免疫调控联合神经调控，IF由11.4提高为25.5

免疫调控是指机体对外界刺激做出的免疫反应过程中，通过各种调控机制来保持免疫平衡状态，以及恢复正常免疫应答的能力。 近年来，免疫调控相关的研究层出不穷，2023年中标数高达985个，可见大家对于这一研究方向的热衷。今天给大家整理了几篇近年发表的高分文章，与大家共同学习一下免疫调控方向有哪些新的研究思路。1、Cell（IF=64.5），C5a-licensed phagocytes drive sterilizing immunity during systemic fungal infection系统性念珠菌感染是一种常见的、高死亡率的医院真菌感染。…

关于活体成像技术介绍

1什么是小动物活体成像技术？ 小动物活体成像技术是指应用影像学方法，对活体状态下的生物过程进行组织、细胞和分子水平的定性和定量研究，其基本原理是光可以穿透实验动物的组织并且可由仪器量化检测到光强度，同时反映出细胞的数量。常用于皮下移植瘤、原位移植瘤和尾静脉注射转移瘤等模型中。 小动物活体成像技术主要分为可见光成像（optical）、核素成像（PET/SPECT），核磁共振成像（MRI），计算机断层扫描（CT）和超声成像（Ultrasound）五大类，下表为这几种技术的差异汇总…

实验流程干货|悬浮细胞检测CCK8和MTT 小tips

一、细胞 1.选择适当的细胞接种浓度.贴壁细胞:考虑到细胞大小不同，建议根据具体情况适当调整细胞的密度布局。悬浮细胞:一般在96孔板中，每个孔放置10000个细胞，可通过细胞计数的方式来进行布板。 采用状态很好的细胞去铺版,传代太多的细胞不宜拿来使用。铺版如果太稀细胞的杀伤不会很明显,太密细胞可能都会死掉,细胞密度多采用10000个/孔.100ul/孔2.药物浓度和处理时间的设定. 不同类型的细胞对药物的敏感性存在差异。若药物浓度未知，可查阅文献，参考他人的研究结果来初步…

5个 WB 细节，教你拿到漂亮图

小编整理了 5 个 WB 实验细节技巧，带你从细节手法出发，优化 WB 实验结果。5个 WB 细节，带你靠自己的双手，拿到漂亮图！样本切记煮沸勿偷懒煮沸的首要目的是使蛋白质完全变性，即破坏蛋白质的三级和四级结构，使其展开成线性形式。这样，蛋白质分子在电泳过程中的迁移速率将主要取决于它们的分子量，而不是它们的构型差异。将样本与加载缓冲液按 1:1 比例混合将混合后的样本在沸水浴中煮沸 5 分钟，这个步骤可以确保蛋白质的变性。煮沸过程中，SDS-蛋白质复合物的形成更加均匀，有助…

细胞实验 | 关于流式细胞术的那些事

什么是流式细胞术？流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）能够快速测定细胞悬液中单个细胞的生物学性质，并可以对特定的细胞进行分选收集。广泛用于细胞生物学，免疫学，遗传学，基础医学等领域。高速客观、结果稳定、具有统计学意义，能够处理复杂样本并同时获取多种参数，是它的特点和优势。那么，流式细胞仪究竟可检测哪些样本？都能检测什么指标？今天就具体来给大家讲一讲样本的分类以及流式细胞术的应用有哪些。①可检测样本类型•外周血、骨髓、细胞穿刺液、洗脱液、实体组织、培养…

microR-125a-5p通过Sp1/SIRT1/HIF-1a信号轴调控吸烟致COPD病程中的肺上皮细胞早衰

慢性阻塞性肺病（COPD）影响着全球 3 亿多人的健康。COPD的临床特征包括咳痰、慢性咳嗽、喘息、起效缓慢和持续时间长。常见的治疗策略包括戒烟、支气管扩张剂治疗、辅助供氧、肺康复和肺移植。香烟烟雾（CS）是公认的COPD危险因素，其引起的氧化应激与导致细胞衰老和衰老相关分泌表型（SASP）的各种机制有关。在COPD病程中，CS诱导上皮细胞和成纤维细胞中衰老标志物p16、p19和p21的表达。这种早衰表型使得细胞失去再生能力，从而阻止肺细胞的更新和修复，最终导致COPD发生发展。然而，…

铁死亡/自噬/凋亡/焦亡/坏死性凋亡怎么区分？一文全解答

细胞有许多“花样”死亡方式，比如大家常见的细胞凋亡、焦亡、铁死亡等等。不同细胞死亡方式的时间线（DOI: 10.1038/s12276-023-01078-x）不同的细胞死亡方式有其特异的生化特征，形态特征及调控路径等。一起来了解......01细胞凋亡细胞凋亡（Apoptosis），又称细胞自杀，是细胞在基因控制下主动死亡的过程，这种细胞死亡方式有助于从组织中移除不必要或有害的细胞，而不触发炎症反应。细胞凋亡的特点：◆ 细胞收缩：细胞体积缩小，细胞膜变得更加紧密。◆ 核凝集和碎裂：细胞核物质凝…

蛋白质含量测定方法对比

前言:蛋白质是生命的物质基础，是生命活动的主要承担者，也是科研工作中的重要研究对象。其中蛋白质的含量测定是生物化学和其他生命学科最常涉及的分析内容，是临床上诊断疾病及检查康复情况的重要指标，也是许多生物制品、药物、食品质量检测的重要指标，在生化实验中，对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析，是一项非常重要的工作。2020版中国药典中收录了6种蛋白质含量的测定方法，分别是凯氏定氮法、双缩脲法、福林酚法（Lowry法）、双缩脲法、2,2'-联喹啉-4,4'-二羧酸…

2025年将成为国自然基金申请最容易的一年？

国家自然科学基金（国自然）作为我国支持基础研究的重要力量，其资助政策的变化牵动着无数科研人员的心。本文将深入分析国自然近年来的改革举措，探讨为何2025年可能成为国自然申请的最佳时机。一.政策利好，释放科研活力1.面上项目申请限制取消： 以往，面上项目连续两次申请未中者需暂停一年申请，这在一定程度上限制了科研人员的持续研究。而2024年取消了这一限制，为科研人员提供了更多机会，预计申请热情将在未来几年持续高涨，也增加了优质项目获得资助的可能性。2.杰青项目支持…